Fluorescence in situ hybridization
(FISH)
Kajian molekul menggunakan kaedah fluoresent untuk menilai gen dan / atau jujukan DNA pada
sesuatu kromosom.
Manusia biasanya mempunyai 23 pasang kromosom: 22 pasang
kromosom yang bukan berkaitan jantina (autosom) dan 1 sepasang kromosom seks
(XX untuk perempuan dan XY untuk lelaki). DNA terdiri daripada dua bebenang
yang terikat bersama-sama dalam struktur double heliks ( tangga spiral). Setiap
bebenang heliks adalah pelengkap yang lain.
Untuk ujian FISH, sampel sel yang mengandungi DNA diletakkanpada
slaid kaca. Sampel digunakan termasuk
darah, sumsum tulang, cecair amniotic, atau sel-sel tumor, bergantung pada
petunjuk klinikal. Slaid dengan "sasaran" (individu) DNA dipanaskan
untuk memisahkan dua bebenang DNA kepada bebenang DNA tunggal. Fluoresent Probe kemudian ditambah
kepada sampel. . Fluoresent Probe adalah
sebahagian DNA tunggal yang menjadi pelengkap kepada bahagian-bahagian tertentu
DNA yang disasarkan. Probe, yang
dilabel dengan pewarna fluoresent,
melekat kepada bahagian DNA tertentu (kawasan sasaran). Apabila slaid diperiksa
di bawah mikroskop khas, gen yang sepadan dengan probe boleh dilihat sebagai kawasan fluorescence, yang akan muncul sebagai tompok cerah pada latar
belakang gelap.
Teknik ini boleh digunakan untuk menunjukkan kehadiran
salinan gen tambahan (duplicated or
amplified genes), dan urutan genetik yang hilang (gene deletions) atau telah dipindahkan (translocated genes). Penambahan bilangan kromosom, seperti yang
dilihat dalam gangguan genetik tertentu, juga didiagnosis menggunakan teknologi
FISH(trisomi 21 atau Sindrom Down, contohnya). Kawasan yang disasarkan atau
urutan DNA ditentukan oleh probe yang
digunakan. Pelbagai kawasan sasaran pada urutan DNA boleh ditentukani pada masa
yang sama menggunakan probe FISH yang
dilabelkan dengan beberapa pewarna pendarfluor berbeza.